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体视显微镜能看到组织结构吗?

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体视显微镜能看到组织结构吗?

发布日期:2019-01-19 作者:admin 点击:

关于组织结构的体积;在冰冻固定时,要求体视显微镜所分析的组织或细胞在极短的时间由37℃降至一80℃以下。因此组织块不能像在制备超薄切片标本,特别是为戊二醛固定所要求的那种大小一般来说,徕卡显微镜的人们用分散的细胞(如血细胞),或体视显微镜分离的细胞(如心肌细胞)或培养细胞。


举例如下,日人铃木研究骨骼肌收缩与舒张时C8a 在质网中的释放与摄取过程以及Cat十在肌质网中的流动途径,他分离蛙胖肠肌单根肌纤维(即骼肌细胞),给予电刺激后在不同时相将其冰冻固定。体视显微镜当然也可以将组织块直接冰冻固定,但体积要相当小,保证组织块中大部分细胞(主要是四周的细胞)能保存好而无冰晶形成。一个非常重要的问题是在取材和分离细胞过程中必须十分仔细,体视显微镜绝不能损伤待观察分析的细胞。


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因为作X线徽区分析不但步骤繁多,奥林巴斯显微镜而且成本甚高,如果经过长时间及多步骤的处理后,所分析的细胞是受损伤的细胞或死细胞,体视显微镜得出错误的结论是非常遗憾的.如经过胶元酶处理分离出的心肌细胞有两种形态,一种是长杆状,排斥台盼蓝;一种是圆形,用台盼蓝染色时着蓝色.后者是在细胞分离过程中受损伤的濒死细胞。这体视显微镜两种细胞中电解质的含量及分布十分不同。圆形心肌细胞中Na 甚高而K 极低,线粒体中的Caz十浓度十分高(25Ummol/kgdryweight),经过与其它分析方法核对,证明圆形细胞高Na 低K 及线粒体内高Ca2 是由于在细胞分离过程中细胞膜受损伤的结果。  


体视显微镜细胞及组织的冰冻固定方法往往是先采取碎冷固定(quench-freeze),然后放入液氮中保存。碎冷固定对于保存的效果十分重要。体视显微镜活细胞或新鲜组织中富含水分,偏光显微镜当淬冷时往往是细胞或组织与碎冷剂(特别是用液氮碎冷时)直接接触的部位先冷冻固定,因而形成一个“壳”,体视显微镜便妨碍了细胞的中心部位碎冷固定。因此体视显微镜在作X-线微区分析时,常常发现较大的细胞的中心部位有冰晶存在。


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